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兔补体的制备

浏览: 0 次 发布时间:2025-05-22

兔补体与人类补体系统有相似之处,可以作为研究工具来模拟或研究人体内的补体激活过程。这有助于深入理解补体系统在宿主防御机制中的作用。兔补体的制备涉及多个步骤,以下是详细的制备过程:

一、兔补体动物选择与采血

‌选择动物‌:选择无寄生虫及未经免疫注射过的健康家兔,通常使用8至12周龄的新西兰白兔和/或加利福尼亚白兔。

‌采血‌:通过颈动脉取血,将采集的血液放入37℃温箱中放置1小时,待血块收缩后,在4℃下以2000r/min离心15分钟,分离出血清。

二、兔补体补体纯化与吸附

‌人红血球吸附‌:取适量A型血及B型血,混入ACD保养液中,将红细胞用盐水冲洗多次后混合,并以2000r/min离心除去大部分洗涤液。取家兔血清和人体红血球等量混合,在4℃(冰水中)每10分钟搅匀1次,持续1小时,以吸收掉Forssman抗体。

‌离心与分装‌:在0℃以2000G再离心10分钟,将已吸收的上层血清分装,每支0.5ml,于-20℃或-80℃保存。

三、兔补体补体活力测定

每批补体都需进行活力测定,以确保其质量。常用的测定方法包括淋巴细胞毒试验等,通过检测补体在特定反应中的活性来评估其质量。

四、兔补体储存与使用

‌储存条件‌:兔补体体应在-70℃或更低温度下储存,并在2-8℃下解冻后使用。避免多次冻融循环,以免影响补体活力。

‌使用前处理‌:兔补体体在使用前应在冰上或冷水浴中解冻,切勿使用温水或热水解冻。解冻后的补体应尽快使用,避免长时间放置。


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